jetPRIME®

Réactif polyvalent pour la transfection d’ADN et de siRNA

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Description du produit

jetPRIME® est un réactif de transfection d’ADN et de siRNA polyvalent et efficace pour les transfections courantes offrant ainsi des résultats scientifiques fiables. jetPRIME® assure à la fois une haute efficacité de transfection et un excellente extinction de gènes dans un grand nombre de lignées cellulaires adhérentes. jetPRIME® est idéal pour la co-transfection d’ADN et de siRNA, mais également pour la transfection de plusieurs plasmides. jetPRIME® assure une excellente viabilité cellulaire puisqu’il requiert peu de réactif et d’acides nucléiques.

Haute efficacité de transfection

jetPRIME® est un réactif de transfection efficace pour les transfections de routine. jetPRIME® permet d’obtenir 70 à 90 % d’efficacité de transfection dans une large majorité de lignées cellulaires adhérentes. Ainsi, jetPRIME® surpasse les autres réactifs de transfection présents sur le marché (Fig. 1). Plusieurs autres types de cellules, telles que les cellules primaires, sont efficacement transfectées par jetPRIME®.

jetPRIME - Efficiency in different cell lines

Fig. 1: Comparaison de l’efficacité de transfection avec jetPRIME® par rapport au concurrent principal. L’efficacité de transfection a été analysée par FACS dans plusieurs lignées cellulaires 24 h après transfection dans des plaques 24 puits, selon les recommandations du fabricant pour les compétiteurs L2K (0.8-1 µg de plasmide + 1.6-2 µl de réactif par puits) et 1 µl de réactif par puits pour jetPRIME®.

Economique : utilisez moins d’ADN et moins de réactif

jetPRIME® est un puissant agent de transfection in vitro qui requiert de faibles quantités de réactif et d’ADN, ce qui le rend très économique (Tableau 1).

jetPRIME FR Tableau1
Tableau 1: Quantités d’ADN et de réactif recommandées. Quantités d’ADN et de réactif (jetPRIME® et compétiteurs) conseillées par puits dans une plaque 6 puits pour une transfection selon les recommandations du fabricant.

En plus de réduire les coûts, diminuer la quantité d’ADN minimise les effets cytotoxiques de la transfection. C’est pourquoi jetPRIME® est le réactif de choix pour transfecter efficacement tout en conservant une excellente viabilité cellulaire.

Excellente viabilité cellulaire

jetPRIME® assure une excellente viabilité cellulaire et améliore les résultats de transfection. Les cellules transfectées avec jetPRIME® sont saines alors qu’une forte cytotoxicité est observée avec les compétiteurs (Fig. 2).

jetPRIME: Viabilité cellulaire
Fig. 2: Viabilité cellulaire 24 h après transfection.
Cellules HeLa observées au microscope à contraste de phase, 24 h après des transfections réalisées selon les recommandations du fabricant pour chaque réactif.

Protocole

 jetPRIME® est un réactif de transfection simple d’utilisation :

  • Facile à adapter à différentes échelles
  • Compatible avec le sérum et les antibiotiques
jetPRIME - protocol
Fig. 3: Protocole de jetPRIME®. Protocole de jetPRIME® pour l’ADN, le siRNA et la co-transfection d’ADN et de siRNA.

 

Retrouvez nos conseils d’experts sur Genetic Engineering and Biotechnology News.

VIDEO: transfection d’ADN avec jetPRIME®

Polyplus-transfection et Greiner Bio-One s’associent pour vous proposer le webinaire suivant : « Une approche alternative pour obtenir une meilleure efficacité de transfection ». Ecoutez l’enregistrement du séminaire en intégralité.

 

Applications

Transfection de plasmide

jetPRIME® permet d’obtenir un pourcentage de transfection très élevé dans des lignées cellulaires adhérentes d’origines diverses (Tableau A1).

jetPRIME - cell list
Tableau A1: Efficacité de transfection de plusieurs lignées cellulaires avec jetPRIME®. Le pourcentage de cellules exprimant la GFP a été déterminé par FACS 24 h après transfection.

Les plasmides sont des molécules d’ADN circulaire double-brin que l’on retrouve notamment chez les bactéries. Les plasmides se répliquent de façon autonome indépendamment du chromosome bactérien et contiennent des gènes importants pour la survie des bactéries. Les plasmides peuvent être introduits dans des cellules  et utilisés pour sur-exprimer un gène d’intérêt dans une lignée cellulaire. Ce mécanisme appelé transfection d’ADN est couramment utilisé pour étudier la fonction d’un gène ou d’une protéine d’intérêt.

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Edition du génome

Le système CRISPR/Cas9 a récemment émergé comme un moyen très ingénieux et efficace de modifier le génome des cellules de mammifères sur un locus spécifique. Ceci implique une transfection transitoire dans les cellules de mammifères avec soit (a) un ou plusieurs plasmides codant pour la nucléase Cas9, le gRNA spécifique et éventuellement une séquence à insérer, soit (b) un mélange d’un ou deux plasmides et d’une molécule d’ARN (le gRNA).

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Production de virus

jetPRIME® est très efficace pour la production de virus de type AAV et lentivirus dans des lignées cellulaires adhérentes dans des milieux standards comme le DMEM en présence de sérum.

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Forte extinction de gène

jetPRIME® est adapté à l’extinction de gène et la délivrance de siRNA (small interfering RNA), miRNA (microRNA), et d’autres oligonucléotides.

jetPRIME® permet d’obtenir plus de 90 % d’extinction de gène dans de nombreuses lignées cellulaires. Ainsi la transfection de cellules HeLa avec jetPRIME® et 10 nM de siRNA anti-lamine endogène A/C réduit très fortement l’expression du gène lamine A/C jusqu’à un niveau à peine détectable (Fig. 1).

 

jetPRIME - siRNA
Fig. A1: Extinction de l’expression de la lamine endogène A/C avec jetPRIME®. Des cellules HeLa ont été transfectées avec 10 nM de siRNA 21-mer anti lamine A/C. Après 48 h, l’extinction de la lamine A/C a été évaluée par microscopie à immunofluorescence en utilisant un anticorps dirigé contre la lamine A/C.

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Co-transfection de plusieurs acides nucléiques

jetPRIME® est idéal pour la co-transfection d’ADN et de siRNA/miRNA ou la co-délivrance de plusieurs plasmides.

Il a été montré que jetPRIME® permet d’obtenir de hautes efficacités d’extinction de gène dans une large gamme de lignées cellulaires tout en assurant une excellente viabilité. Plus de 90 % d’extinction de gène sont obtenus en cellules adhérentes avec 10 nM de siRNA (Fig. 2).

jetPRIME - cotransfection
Fig. 2: Extinction de l’expression de la luciférase exogène dans plusieurs lignées cellulaires après co-transfection d’ADN et siRNA avec jetPRIME®.
Les expériences ont été réalisées avec 400 ng de p4CMV-Luc et 10 nM de siRNA anti-luciférase, par puits en plaques 6 puits.

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Citations

Voici une courte sélection de publications mentionnant l’utilisation de jetPRIME®. L’ensemble de notre base de données bibliographique est accessible en suivant ce lien: Polyplus-transfection Database.

Charrier, C., Joshi, K., Coutinho-Budd, J., Kim, J. E., Lambert, N., de Marchena, J., Jin, W. L., Vanderhaeghen, P., Ghosh, A., Sassa, T., Polleux, F. (2012). Inhibition of SRGAP2 function by its human-specific paralogs induces neoteny during spine maturation., Cell 149, 923-3.

Ichim, G., Genevois, A. L., Menard, M., Yu, L. Y., Coelho-Aguiar, J. M., Llambi, F., Jarrosson-Wuilleme, L., Lefebvre, J., Tulasne, D., Dupin, E., Le Douarin, N., Arumae, U., Tauszig-Delamasure, S., Mehlen, P. (2013). The Dependence Receptor TrkC Triggers Mitochondria-Dependent Apoptosis upon Cobra-1 Recruitment., Mol Cell 51, 632-4.

Rodriguez, M. I., Peralta-Leal, A., O’Valle, F., Rodriguez-Vargas, J. M., Gonzalez-Flores, A., Majuelos-Melguizo, J., Lopez, L., Serrano, S., de Herreros, A. G., Rodriguez-Manzaneque, J. C., Fernandez, R., Del Moral, R. G., de Almodovar, J. M., Oliver, F. J. (2013). PARP-1 regulates metastatic melanoma through modulation of vimentin-induced malignant transformation., PLoS Genet 9, e1003.

Shi, J., Zhao, Y., Wang, Y., Gao, W., Ding, J., Li, P., Hu, L., Shao, F. (2014). Inflammatory caspases are innate immune receptors for intracellular LPS., Nature 514, 187-9.

Thomas, M. G., Luchelli, L., Pascual, M., Gottifredi, V., Boccaccio, G. L. (2012). A monoclonal antibody against p53 cross-reacts with processing bodies., PLoS ONE 7, e3644.

 

Témoignages

“jetPRIME gave better transfection efficiencies than other reagents tested and much less cell death was noticed.  The cells don’t seem to mind being treated with the transfection reagent, there is no need to change the media anyway.  I’ve already ordered a bigger volume of jetPRIME and have used half of it already! Will possibly be ordering some more soon!”

Kimberley S, Royal Veterinary College, UK

 

“I already ordered jetPRIME. It was very efficient and easy to use! Also the cells were in a good state after transfection. Good product!”

Cosima R, University Hospital Erlangen, DE

 

“Very good transfection efficiency, better value and ease of use”

Sean H. MD Anderson Cancer Center, USA

 

“jetPRIME has low toxicity and with less amount of DNA and the transfection reagent comparable expression can be achieved. I would prefer using Jet prime over other reagents for the above mentioned reasons.”

Vijayalakshmi A, Baylor College of Medicine (BCM), USA

 

Qualité

Chaque lot de jetPRIME® est testé par transfection de cellules HeLa avec un plasmide exprimant la GFP. Chaque tube de réactif est livré avec un certificat d’analyse.