jetMESSENGER®

Réactif de transfection d’ARNm pour les cellules difficiles à transfecter

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Description du produit

Améliorez votre expression génique en passant à l’ARNm !

Les cellules primaires, les neurones, les cellules en suspension et de nombreuses lignées de cellules cancéreuses sont particulièrement difficiles à transfecter avec de l’ADN plasmidique. La transfection d’ARNm avec jetMESSENGER® permet d’obtenir d’excellentes efficacités d’expression génique dans la plupart de cellules dites difficiles à transfecter.

La transfection d’ARNm est aussi simple que la transfection d’ADN avec l’avantage que l’ARNm peut s’exprimer directement dans le cytosol. Ceci permet d’éviter l’étape limitante du transport de l’ADN dans le noyau, souvent reliée à la vitesse de division cellulaire. Par conséquent, les cellules qui se divisent peu peuvent aussi exprimer efficacement un transgène introduit, lorsque ce dernier est sous la forme d’ARNm.

Révélez tout le potentiel de vos cellules en utilisant de l’ARNm !

Polyplus-transfection - Trends in Transfection Vidéo disponible : Transfection d’ARNm pour les cellules difficiles à transfecter (anglais)

Surpasse la transfection d’ADN à chaque expérience!

jetMESSENGER® est un agent de transfection d’ARNm efficace et adapté pour les cellules adhérentes et en suspension. La transfection d’ARNm présente de nombreux avantages par rapport à l’ADN.

  • Aucun risque d’intégration génomique donc aucun risque de modification du génome des cellules transfectées ou de mutation insertionnelle
  • Aucune régulation transcriptionelle non souhaitée de l’expression génique
  • Expression élevée et rapide
  • Non toxique pour les cellules

jetMESSENGER® a été développé pour offrir une efficacité de transfection très performante dans les cellules qui sont habituellement difficiles à transfecter, permettant ainsi l’obtention d’une expression génique dans un grand nombre de types cellulaires (Fig. 1.).

jetMESSENGER outperforms DNa competitor

Fig. 1. L’efficacité de transfection obtenue avec jetMESSENGER® est supérieure à celle de son concurrent principal (L2K). L’efficacité de transfection a été mesurée par cytométrie en flux 24 h après transfection d’ARNm (5-methyl Cytosine, pseudo-uridine, Trilink™) ou d’ADN plasmidique codant pour l’EGFP dans différentes lignées cellulaires. Les conditions expérimentales ont été réalisées en suivant les recommandations des fabricants pour chaque réactif.

Efficace sur une grande variété de lignées cellulaires

Avec jetMESSENGER®, obtenez une efficacité de transfection inégalée dans une grande variété de lignées cellulaires, des cellules cancéreuses adhérentes ou en suspension jusqu’aux cellules primaires fragiles comme les fibroblastes, les cellules souches, ou les neurones. (Table 1.)

jetMESSENGER - Table Transfection efficiency per cell types

Table 1. jetMESSENGER® permet une efficacité de transfection élevée dans une grande variété de types cellulaires.

Simple d’utilisation

jetMESSENGER® est facile d’utilisation : diluez les ARNm dans le tampon fourni, ajoutez jetMESSENGER® dans la solution d’ARNm diluée et ajoutez le mélange au milieu de culture cellulaire en présence/absence de sérum (compatible avec des antibiotiques) (Fig. 2.).

jetMESSENGER - Protocol
Fig. 2. Processus simple d’utilisation. Volume et quantité décrits pour une expérience en plaque 24 puits.

Excellente viabilité cellulaire

En éliminant le besoin d’atteindre le noyau pour exprimer un gène, jetMESSENGER® permet la transfection des cellules quiescentes et se divisant peu. De plus, le mode d’action de jetMESSENGER® est doux et permet de conserver une viabilité cellulaire élevée ainsi que la morphologie inhérente des cellules durant la transfection (Fig. 3.). Travaillez dans le respect de la physiologie cellulaire avec jetMESSENGER® !

jetMESSENGER - Microscopy

Fig. 3. jetMESSENGER® n’affecte pas la viabilité cellulaire et induit une expression protéique plus élevée que la transfection d’ADN. Les neurones primaires de cortex de rat, les cellules d’hépatocarcinome Hep G2 et les cellules souches murines ont été observées 48 h après transfection d’EGFP par microscopie en contraste de phase et à fluorescence. Les transfections ont été réalisées avec jetMESSENGER®/ARNm EGFP (5-methyl Cytosine, pseudo-uridine, Trilink™) et L2K/ADN plasmidique pCMV-EGFP en suivant les recommandations des fabricants pour chacun des réactifs.

Applications

Transfection ARNm

jetMESSENGER®  est parfaitement adapté pour exprimer un gène à partir d’ARNm, dans les cellules difficiles à transfecter telles que les neurones, les cellules souches, ou encore différentes lignées cancéreuses (Fig. 1. & 2.)

jetMESSENGER - Cells

Fig. 1. Transfection avec jetMESSENGER® de diverses cellules difficiles à transfecter. Différentes lignées cellulaires ont été analysées par microcopie à fluorescence 48 h après transfection. Les transfections ont été réalisées avec jetMESSENGER®/ARNm EGFP (5-methyl Cytosine, pseudo-uridine, Trilink™) en suivant les recommandations du fabricant. Les données sur les lignées cellulaires cancéreuses OVCAR-3, NCCIT, MDA-MB-231 et SW1353 nous ont été fournies par le laboratoire INSERM U1199 « BioTICLA » (Caen, France)

jetMESSENGER - Primary mouse lung endothelial cells

Fig. 2. jetMESSENGER® est adapté pour transfecter des ARNm dans les cellules pulmonaires primaires de souris. Ces cellules ont été analysées par microscopie à fluorescence, 48 h après transfection. La cotransfection a été réalisée avec des ARNm modifiés codant pour nGFP et mCherry en utilisant jetMESSENGER®. Les données nous ont été fournies par T. Itkin, Weill Cornell Medicine, USA.

Applications en neurosciences

jetMESSENGER® permet d’obtenir une efficacité de transfection élevée dans les neurones primaires tout en maintenant la physiologie et la morphologie des cellules pendant plusieurs jours, permettant ainsi une expression sur le long terme favorable pour les études en neurosciences (Fig. 3.)
jetMESSENGER - Neuron brightfield JetMESSENGER - Neuron fluorescence

Fig. 3. jetMESSENGER® est adapté pour transfecter des ARNm dans les neurones primaires de cortex de rat. Ces neurones ont été analysés par microscopie en contraste de phase et à fluorescence 48 h après transfection. La transfection a été réalisée avec jetMESSENGER®/ARNm EGFP (5-methyl Cytosine pseudo-uridine, Trilink™) en suivant les recommandations du fabricant.

Applications CRISPR/Cas9

jetMESSENGER® est parfaitement adapté aux expériences d’édition du génome telles que CRISPR/Cas9 en utilisant la transfection d’ARNs.

Reprogrammation cellulaire

Les cellules transfectées avec jetMESSENGER® ont une excellente viabilité et une expression à long terme de la protéine d’intérêt ce qui fait de jetMESSENGER® l’outil de transfection idéal pour des expériences de reprogrammation. Il est maintenant possible de transformer n’importe quelles cellules du corps en cellules souches pluripotentes. Par exemple, il est possible de dédifférencier des fibroblastes en iPS avec des ARNm à l’aide de jetMESSENGER®.

jetMESSENGER - Fibroblast brightfieldjetMESSENGER - Fibroblast fluorescence

Fig. 4. jetMESSENGER® est adapté pour transfecter des ARNm dans les cellules BJ (fibroblastes humains). Les cellules BJ ont été analysées par microscopie en contraste de phase et à fluorescence, 48 h après transfection. La transfection a été réalisée avec jetMESSENGER®/ARNm EGFP (5-methyl Cytosine, pseudo-uridine, Trilink™) en suivant les recommandations du fabricant.

Immunothérapie

L’efficacité de transfection dans les cellules cancéreuses et les cellules immunitaires permet à jetMESSENGER® d’être utilisé pour une large gamme d’applications en cancérologie et immunothérapie.

Témoignage

“Application of jetMESSENGER reagent to introduce modified RNA molecules into primary lung mouse endothelial cells (a cell population which is generally hard to transfect with DNA/RNA using non-viral methodology) resulted with the highest transfection rate (>70%) and with the lowest toxicity effects as compared to other tested RNA/DNA transfection reagents (jetPEI, TransIT, & RNAiMAX).”
Itkin T., Weill Cornell Medicine, New York, United States

“jetMESSENGER appears as a very effective reagent for RNA transfection in human cancer cells of various origins. The expression level intensity and the transfected cells proportion were very impressive as compared to conventional DNA transfection reagents, without any sign of cytotoxicity.”
Brotin E., Abeilard E., Denoyelle C., Poulain L. Inserm U1199 « BioTICLA », Caen, France

Qualité

Chaque lot de jetMESSENGER® est testé par transfection de cellules CaCo-2 avec des ARNm codant pour la GFP. Chaque tube de réactif est livré avec un certificat d’analyse.