FectoPRO®

Rendement de production inégalé en CHO et HEK-293

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De plus grandes quantités sont disponibles sur demande. N’hésitez pas à nous contacter.

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Description du produit

Pour la première fois, obtenez de forts taux de production protéique en utilisant la transfection transitoire.
Le kit de transfection FectoPRO® est spécifiquement conçu pour une expression génique transitoire (TGE) améliorée dans les cellules CHO et HEK-293 cultivées en suspension dans divers milieux sans sérum. La transfection réalisée avec FectoPRO® est facilement adaptable à différents volumes allant de quelques ml à plusieurs litres de culture cellulaire assurant ainsi une production de protéines reproductible tout en utilisant de faibles quantités d’ADN (< 1 µg/ml de culture cellulaire). Une productivité améliorée et les faibles quantités d’ADN nécessaires font de FectoPRO® une solution extrêmement compétitive pour les processus de bioproduction.

Haute production de protéines et d’anticorps

FectoPRO® permet d’obtenir d’excellents taux de production de protéines et d’anticorps dans les cellules CHO et HEK-293 cultivées en suspension dans du milieu sans sérum (Fig. 1).

FectoPRO - antibody yields CHO cells
Fig. 1. FectoPRO® donne d’excellents taux de production de protéines et d’anticorps dans des cellules CHO en suspension. Les cellules ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml de milieu FreeStyle™ CHO et transfectées avec FectoPRO® (0,8 µg d’ADN/ml) ou FreeStyle™ MAX Reagent (1,25 µg d’ADN/ml) selon les protocoles respectifs des réactifs. Le taux de production d’IgG recombinante de souris a été analysé 1 à 6 jours après transfection en utilisant un biocapteur constitué de protéine G (fortéBIO® octet RED96 system). Ces données ont été fournies par ProteoGenix SAS (France).

FectoPRO® surpasse largement les autres réactifs de transfection utilisés généralement en bioproduction en terme d’efficacité de transfection (Fig. 2) ce qui conduit à un taux de production protéique supérieur (Fig. 3).

FectoPRO - Microscopie
Fig. 2. Haute efficacité de transfection avec FectoPRO® dans les cellules CHO cultivées en suspension. Les cellules FreeStyle™ CHO-S ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml de milieu FreeStyle™ CHO et transfectées avec FectoPRO® + FectoPRO® Booster (0,4 µg d’ADN/ml), ou FreeStyle™ MAX Reagent (1,25 µg d’ADN/ml) avec un plasmide exprimant la GFP. L’expression de la GFP a été analysée 24h après transfection par microscopie à fluorescence.

FectoPRO - CHO cells

FectoPRO - HEK-293F cells
Fig. 3. Avec FectoPRO®, obtenez des rendements protéiques inégalés dans les cellules CHO et HEK-293 cultivées en suspension. Les cellules FreeStyle™ CHO-S et HEK-293F ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml de milieu FreeStyle™ CHO ou 293 et transfectées avec FectoPRO® + FectoPRO® Booster (0,4 µg d’ADN/ml), FreeStyle™ MAX Reagent (1,25 µg d’ADN/ml) ou PEIpro™ (1µg d’ADN/ml) selon les protocoles respectifs des réactifs. La production d’IgG3-Fc (34 kDa) a été analysée 72 h (cellules CHO) et 120 h (cellules HEK-293) après transfection par chromatographie d’affinité avec la protéine G (HPLC) et par Western Blot. Le standard correspond à l’IgG3-Fc purifiée (34 kDa).

Economique : jusqu’à 2 fois moins d’ADN et de réactif 

Les préparations d’ADN plasmidique de bonne qualité peuvent être très chères, surtout quand de grandes quantités d’ADN et de nombreux plasmides sont requis pour une production protéique à grand échelle. FectoPRO® permet d’économiser de 40 à 60 % du coût de l’ADN en utilisant 0,4 à 0,6 µg d’ADN/10e6 cellules/ml de culture cellulaire. De ce fait, ce kit est une solution abordable et économique pour les processus de bioproduction (Tableau 1).

FectoPRO - Table comparison competitor
Tableau 1. Quantité d’ADN et volume de réactif (FectoPRO® et compétiteurs) requis pour la transfection selon les recommandations des fabricants.

Production protéique sur plusieurs jours

La durée des processus de production protéique a augmenté depuis quelques années et la plupart de ces processus dure maintenant 1 à 2 semaines pour obtenir la quantité optimale de protéine produite. FectoPRO® a été développé pour assurer une production protéique maintenue sur plusieurs jours tout en conservant une forte viabilité cellulaire pour optimiser les productions de protéine de longue durée (Fig. 4).

FectoPRO - Production + viability in HEK-293
Fig. 4. Production protéique maintenue dans les cellules en suspension avec FectoPRO®. Les cellules FreeStyle™ HEK-293F ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml de milieu FreeStyle™ 293 et transfectées avec FectoPRO® + FectoPRO® Booster (0,5 µg d’ADN/ml) selon le protocole standard. La production d’IgG3-Fc a été analysée à plusieurs jours par chromatographie d’affinité avec la protéine G (HPLC). Des résultats similaires ont été obtenus avec les cellules FreeStyle™ CHO-S (données disponibles sur demande).

Adaptable à différentes échelles de production

Utilisez un processus de bioproduction avec un protocole robuste facilement adaptable à partir de 30 ml jusqu’à plusieurs litres de milieu de culture sans variation spécifique (Fig. 5).

FectoPRO - CHO viability

FectoPRO - CHO protein production

FectoPRO - Scalability
Fig. 5. FectoPRO® est reproductible et facilement adaptable à différentes échelles de production dans les cellules CHO. Les cellules FreeStyle™ CHO-S ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml, 100 ml, 300 ml ou 1 L de milieu FreeStyle™ CHO et transfectées avec FectoPRO® + FectoPRO® Booster (0,5 µg d’ADN/ml). Un à 6 jours post-transfection, la viabilité cellulaire a été analysée avec un test d’exclusion au bleu Trypan (A) et la production d’IgG3-Fc a été analysée par chromatographie d’affinité avec la protéine G (HPLC) (B) et par Western Blot (C). Le standard (C) correspond à l’IgG3-Fc purifié (34 kDa).

Rendements de production reproductibles

FectoPRO® est fabriqué et formulé en utilisant des processus de fabrication hautement contrôlés, permettant ainsi des résultats hautement reproductibles d’une expérience à l’autre. De plus, les lots de FectoPRO® sont libérés suite à des contrôles qualité avancés incluant une spécification pour la production de protéine ce qui garantit une excellent reproductibilité de lot à lot (Fig. 6).

FectoPRO - Reproductibility batch to batch
Fig. 6. Excellente reproductibilité entre les lots. Les cellules CHO cultivées en suspension ont été mises en culture à 1 x 106 cellules/ml dans 30 ml de milieu CHO et transfectées en utilisant 3 lots différents de FectoPRO® (CCIII 078, CCIII 104 ou CCIII106) selon le protocole standard. 72h après transfection, la production d’IgG3-Fc a été analysée par chromatographie d’affinité avec la protéine G (HPLC). Des résultats similaires ont été obtenus sur des cellules HEK-293 en suspension (données disponibles sur demande).

Compatible avec de nombreux milieux d’expression

Contrairement à d’autres réactifs disponibles dans le commerce, le kit de transfection FectoPRO® est adapté à la fois aux cellules CHO et aux HEK-293 (Fig. 2 et 3). Le réactif est compatible avec de nombreuses formulations de milieux ce qui le rend simple et rapide à implémenter au laboratoire (Fig. 7, Tableau 2).

FectoPRO - protein production
Fig. 7. Hauts rendements de protéines dans les cellules CHO cultivées en suspension dans différents milieux. Les cellules CHO ont été mises en culture à 1 x 10e6 cellules/ml dans 30 ml de milieu FreeStyle™ CHO, CD CHO ou Pro-CHO™ 4 et transfectées avec FectoPRO® + FectoPRO® Booster ou FreeStyle™ MAX Reagent selon leur protocole respectif. La production d’IgG3-Fc a été analysée 72h après transfection par une quantification basée sur l’affinité de protéine G (HPLC).

 

FectoPRO - Tableau CHO
Tableau 2. Efficacité de production protéique avec FectoPRO® dans différents milieux de culture pour cellules CHO.
FectoPRO - Tableau HEK
Tableau 3. Efficacité de production protéique avec FectoPRO® dans différents milieux de culture pour cellules HEK-293.

FreeStyle™, CD FortiCHO™, CD OptiCHO™, Expi293™ and CD293™ sont des marques déposées de Life Technologie™s Corporation.

Pro-CHO™, PowerCHO™ and Pro293™ sont des marques déposées de Lonza™.

HyClone™, HyCell™ and TransFx™ sont des marques déposées de GE Healthcare™.

FectoPRO® est également adapté à la production de virus.

 

Application: Production transitoire de protéines

La production de protéines consiste à sur-exprimer une protéine recombinante ou un peptide dans une lignée cellulaire à petite / moyenne échelle. Les biomolécules produites peuvent être utilisées à des fins de recherche comme des études structurales, mais également pour des applications médicales et thérapeutiques.

En savoir plus… 

Témoignages

« FectoPRO® donne le meilleur taux de production protéique que nous n’ayons jamais atteint en utilisant la transfection transitoire. Notre entreprise propose de nombreux services tels que la production de protéines en cellules mammifères. Etre capable de produire plus de protéines sans revoir notre système d’expression ouvre de nouvelles possibilités pour nos services de production de protéines et d’anticorps. »

Philippe F., ProteoGenix SAS, France

“I have to admit I had low expectations for FectoPRO®. Perhaps a modest improvement in transfection … an extra 5-10%. J. did her first experiment yesterday and analyzed it today and the result was remarkable. I’m shocked by both the efficiency of transfection and the brightness of the GFP.”

Thomas C., Biogen Idec, United States

“2 x the yield for half the amount of transfection reagent = 4 x less cost.
It is also very easy to use.”

Jean-Philippe J., Hospital for Sick Children, Canada

Qualité

FectoPRO® est garanti sans composés d’origine animale et est chimiquement défini. La gestion systématique des lots et les tests de mises en circulation sont réalisés pour chaque lot produit. Le kit de transfection FectoPRO® subit des contrôles qualité poussés : productivité protéique, viabilité cellulaire et stérilité complète.
Depuis 2002, la société Polyplus-transfection® S.A. est certifiée ISO 9001 et opère selon un Système de Management de la Qualité reconnu et robuste. Ce niveau de certification assure aux clients que le fournisseur a établi des procédés fiables pour le développement, la fabrication, la vente du produit et le support aux clients.