Système d’expression FectoCHO™

Améliorez votre production de protéines transitoires dans les cellules CHO

FectoCHO arguments - French

 

Spécifications
FectoCHO vFR - Résumé

 

Résumé

Le besoin croissant sur le marché biopharmaceutique pour diverses protéines recombinantes et anticorps produits en peu de temps nécessite un système efficace et flexible. L’expression transitoire est un processus couramment utilisé pour faire face à cette demande, mais il est malheureusement limité par l’efficacité de la transfection et par la productivité inhérente, en particulier avec les cellules CHO. Pour surmonter ce problème, nous avons développé un système d’expression transitoire novateur, le système d’expression FectoCHO™, consistant en l’association synergique d’un nouveau milieu CHO chimiquement défini, FectoCHO™ CD, d’un puissant réactif de transfection, FectoPRO® et de son booster d’expression FectoPRO® booster.

Le milieu d’expression FectoCHO™ CD est optimisé pour faciliter l’adaptation et la culture de diverses souches de cellules CHO telles que CHO-K1, CHO-S et ExpiCHO™-S : l’adaptation séquentielle extensive n’est pas nécessaire. La transfection transitoire induite par FectoPRO® dans ce milieu chimiquement défini est optimale et conduit donc à de forts rendements de production de protéines et d’anticorps en utilisant l’expression génique transitoire, avec des rendements protéiques jusqu’à 4 fois supérieurs à ceux des systèmes concurrents.

Contactez-nous

 

Références disponibles

FectoCHO vFR - Références produits

1 mL de réactif de transfection FectoPRO® est suffisant pour transfecter 800 mL à plus d’1L de milieu d’expression FectoCHO™ CD. de plus grandes quantités sont disponibles sur demande. N’hésitez pas à nous contacter.

Demander un devis

 

Description du produit

Forts rendements de production de protéines dans diverses cellules CHO

La combinaison du milieu d’expression FectoCHO™ CD, milieu chimiquement défini optimisé pour la transfection transitoire et l’expression protéique, et de FectoPRO®, un réactif de transfection très performant, conduit à des rendements de production de protéines exceptionnels dans diverses cellules CHO, telles que les cellules CHO-S et CHO-K1. (Fig. 1)

Fig 1. FectoCHO Expression System - High protein yields - Polyplus-transfection

Fig. 1. Le système d’expression FectoCHO™ permet d’obtenir des rendements protéiques plus élevés qu’avec le système d’expression concurrent dans les cellules CHO-S et CHO-K1. Les cellules CHO-S ont été cultivées dans du milieu d’expression FectoCHO™ CD ou dans du milieu FreeStyle™ CHO et transfectées avec le réactif FectoPRO® (0,5 ug d’ADN/ml) ou le réactif FreeStyle™ MAX (1,25 ug d’ADN/ml) en suivant les protocoles recommandés. Des cellules CHO-Kl adaptées à la suspension ont été cultivées soit dans le milieu d’expression FectoCHO™ CD, soit dans FreeStyle™ F17, puis transfectées avec FectoPRO® (0,8 ug d’ADN/ml) ou FreeStyle™ MAX (1,25 ug d’ADN/ml) suivant les protocoles recommandés. La production d’IgG3-Fc a été dosée 7 jours après la transfection en utilisant des biocapteurs de protéine G (fortéBIO® BLItz).

Le milieu d’expression FectoCHO™ permet de maintenir les cellules dans un état physiologique idéal avant, pendant et après la transfection. Cette capacité couplée à l’efficacité de transfection extrêmement élevée de FectoPRO® conduit à des rendements incomparables de production de protéines et d’anticorps en transitoire. En effet, le système d’expression FectoCHO™ permet d’augmenter vos rendements protéiques jusqu’à 4 fois par rapport aux systèmes d’expression concurrents. (Fig. 2)

Fig 2. FectoCHO Expression System - CHO-K1 - Polyplus-transfection

Fig 2. FectoCHO Expression System - CHO-S - Polyplus-transfection

Fig. 2. Le réactif de transfection FectoPRO® et le milieu d’expression FectoCHO™ CD fonctionnent en synergie atteindre des rendements de production incomparables dans les cellules CHO-K1 (A) et CHO-S (B). A. Les cellules CHO-K1 adaptées à la suspension ont été cultivées dans du milieu d’expression FectoCHO™ CD ou FreeStyle™ F17 et transfectées avec le réactif FectoPRO® (0,8 ug d’ADN/ml) ou le réactif FreeStyle™ MAX (1,25 ug d’ADN/ml) selon les protocoles recommandés. La production d’IgG3-Fc a été testée 7 jours après transfection en utilisant des biocapteurs de protéine G (fortéBIO® BLItz). B. Les cellules CHO-S ont été cultivées soit dans le milieu d’expression FectoCHO™ CD, soit dans le milieu FreeStyle™ CHO, et transfectées avec le réactif FectoPRO® (0,5 μg d’ADN/mL) ou le réactif FreeStyle™ MAX (1,25 μg d’ADN/mL) selon les protocoles recommandés. La production d’IgG3-Fc a été testée 7 jours après transfection en utilisant des biocapteurs de protéine G (fortéBIO® BLItz).

Idéal pour les systèmes à haute densité cellulaire tels que les cellules ExpiCHO™-S

Le sytème d’expression FectoCHO™ est particulièrement bien adapté aux cellules poussant à haute densité, telles que les cellules ExpiCHO™-S. Le milieu FectoCHO ™ CD est capable de soutenir la croissance et de maintenir la viabilité à une densité cellulaire très élevée pendant 10 jours, tout en assurant une meilleure efficacité de transfection avec FectoPRO®, conduisant à des rendements de production protéique dans les cellules ExpiCHO™-S très élevés. (Fig. 3)

Fig 3. FectoCHO Expression System vs ExpiCHO system - Polyplus-transfection

Fig. 3. Le système d’expression FectoCHO™ surpasse le système d’expression ExpiCHO™ en termes de cinétique de production de protéines dans les cellules ExpiCHO™-S. Les cellules ExpiCHO-S™ ont été cultivées dans du milieu d’expression FectoCHO™ CD et transfectées avec le réactif FectoPRO® selon le protocole recommandé, ou dans le milieu d’expression ExpiCHO™ et transfectées avec le réactif de transfection ExpiFectamine™ CHO selon le protocole recommandé. La production d’IgG3-Fc a été testée jusqu’à 10 jours après la transfection en utilisant des biocapteurs de protéine G (fortéBIO® BLItz).

Adaptation rapide et sans effort des cellules CHO

Le milieu d’expression FectoCHO™ CD permet aux cellules CHO d’atteindre une densité cellulaire élevée, tout en conservant une excellente viabilité et un temps de doublement court. Ce milieu a été spécifiquement développé pour permettre une adaptation cellulaire simple et rapide, quel que soit le type de cellules CHO utilisé. (Fig. 4) Les cellules peuvent être directement décongelées dans le milieu d’expression FectoCHO™ CD, puis transfectées après quelques passages pour atteindre un rendement d’expression protéique maximal. L’adaptation séquentielle n’est pas nécessaire, ce qui permet une adaptation cellulaire simple et rapide.

Fig 4. FectoCHO Expression system - ExpiCHO-S Adaptation - Polyplus-transfection

Fig. 4. Adaptation rapide et sans effort des cellules ExpiCHO™-S dans le milieu FectoCHO™ CD. Les cellules ExpiCHO-S™ ont été décongelées et maintenues soit dans le milieu d’expression FectoCHO™ CD, soit dans le milieu d’expression ExpiCHO™. La densité cellulaire et la viabilité ont été mesurées en utilisant l’exclusion au bleu Trypan. Des résultats similaires ont été obtenus avec des cellules CHO-S et CHO-K1 (données non présentées).

Les cellules CHO en suspension peuvent également être directement transférées du milieu antérieur au milieu FectoCHO™ CD sans adaptation séquentielle, sans impact sur la croissance et la viabilité cellulaires.

Composition chimique définie

Le système d’expression FectoCHO™ est un kit constitué de 3 composants optimisés pour agir ensemble :
• Le milieu d’expression FectoCHO™ CD, un milieu de culture chimiquement défini optimisé pour l’expression de gène transitoire
• L’agent de transfection FectoPRO®, pour obtenir un rendement protéique exceptionnel, en utilisant une faible quantité d’ADN
• Le booster d’expression FectoPRO®, qui améliore l’expression des gènes pour booster la production protéique

Excellente reproductibilité lot à lot

Les composants du système d’expression FectoCHO™ sont fabriqués et formulés selon un processus de production hautement contrôlé. Cela garantit des résultats hautement reproductibles d’une expérience à l’autre, par conséquent les données peuvent être facilement répétées et les productions de protéines auront des rendements similaires. (Fig. 5)

Fig 5. FectoCHO Expression System - Reproducibility - Polyplus-transfection

Fig. 5. Le système d’expression FectoCHO™ offre une excellente reproductibilité de lot à lot. Les cellules ExpiCHO™-S ont été cultivées dans différents lots du milieu d’expression FectoCHO™ CD et transfectées avec le réactif FectoPRO® en suivant le protocole recommandé. 7 jours après la transfection, la viabilité cellulaire a été mesurée en utilisant l’exclusion au bleu Trypan. La production d’IgG3-Fc a été dosée en utilisant des biocapteurs de protéine G (fortéBIO® BLItz).

Application : Production transitoire de protéines

Le système d’expression FectoCHO™ est parfaitement adapté à la production de protéines et d’anticorps en utilisant l’expression génique transitoire dans diverses lignées cellulaires CHO, telles que les cellules CHO-K1, CHO-S et ExpiCHO™-S. Les composants chimiquement définis du kit ont été optimisés pour fournir des effets synergiques et des rendements de production exceptionnels.

Qualité

FectoPRO®, le booster d’expression FectoPRO® et le milieu FectoCHO™ CD sont garantis sans composants d’origine animale et sont chimiquement définis. Des tests systématiques de gestion et de libération des lots sont effectués pour chaque lot produit. De plus, chaque composant du système d’expression FectoCHO® subit des contrôles de qualité poussés tels que la mesure de la productivité protéique, de la viabilité cellulaire et la stérilité complète.

Depuis 2002, la société Polyplus-transfection® S.A. est certifiée ISO 9001 et opère selon un Système de Management de la Qualité reconnu et robuste. Ce niveau de certification assure aux clients que le fournisseur a établi des procédés fiables pour le développement, la fabrication, la vente du produit et le support aux clients.