jetPRIME®

1-多用途DNA/siRNA转染试剂。

jetPRIME CH Arguments de vente vB

2-基本信息

jetPRIME CH Informations générales vB

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3-可用参考

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4-产品说明

jetPRIME® 是一种新型的多功能DNA和siRNA转染试剂,适用于日常工作。jetPRIME® 在多种贴壁细胞中可确保较高的DNA转染效率和极好的基因沉默。 jetPRIME® 是一种理想的DNA/siRNA共转染试剂。jetPRIME® 对细胞的作用非常温和,因为转染过程中它只需要少量的试剂和核酸。

5-绝佳的转染效率

jetPRIME®是一种常用功效强劲的转染试剂。通常能给各种来源贴壁细胞及原代细胞带来很高的转染率。与主要竞争试剂相比,多种常用细胞系使用jetPRIME® 试剂转染均可获得高达70-90%的转染效率(图1)。

jetPRIME - graphic comparison competitors
图1:jetPRIME®跟竞争试剂的转染效率对比。在24孔板上转染24小时后,用流式细胞仪对各种细胞系中的转染效率进行评定。使用情况依照制造商的推荐方案:同类试剂L2K — L3K、0.5微克的质粒以及1微升/孔的jetPRIME®。

6-更经济:DNA更少,试剂更少

jetPRIME®作为一种功能强大的体外转染试剂,仅需要少量的试剂和质粒DNA(表1),因此非常经济。

jetPRIME - table competitors
表1:推荐使用条件。按照说明书,表中显示为进行转染加入6孔板中每孔的DNA和试剂(jetPRIME® 和其竞争者)用量。

除降低成本外,减少DNA用量同样可以最大程度的减小转染产生的细胞毒性。因此,jetPRIME®是一种高转染效率、高细胞存活率的理想试剂。

7-细胞存活率更高

转染过程中jetPRIME®对细胞的作用极为温和,从而提高了细胞存活率(图2)并改进了转染效果。用jetPRIME®转染的细胞很健康,而其竞争试剂转染的细胞可观察到明显的细胞毒性。

jetPRIME - transfected cells
图2:转染24小时后的细胞活性。按照说明书, HeLa细胞转染24小时后,相差显微镜分析结果。

8-操作简便

jetPRIME®是一种即用型转染试剂:

  • 快速、简便地放大或缩小;
  • 与血清和抗生素兼容。
jetPRIME - protocol
图3:jetPRIME®操作流程。用于 DNA、siRNA及 DNA和 siRNA共转染的 jetPRIME™ 简便流程。

请关注基因工程和生物技术新闻中我们的专家提示(http://www.genengnews.com/gen-articles/7-tips-for-optimal-dna-transfection/4176/)。

视频:使用jetPRIME®进行DNA转染

v.youku.com/v_show/id_XNzA1ODUyODAw.html

Polyplus-transfection和Greiner Bio-One联合主办了最新的教育研讨会《取得更高转染效率的另一种方法》。欢迎收听研讨会完整录音。

9-应用

9.1-质粒转染

jetPRIME®能给各种来源贴壁细胞及原代细胞带来极高的转染百分比。

jetPRIME - cell list
表1:各种细胞类型应用jetPRIME®取得的转染效率。转染24小时后,用FACS测定的GFP阳性细胞。

质粒是常见于细菌的小环状DNA分子。质粒的存在和复制独立于染色体DNA,质粒通常携带细菌存活的关键基因。可以刻意将质粒转入细胞,并在特定细胞系中超表达感兴趣基因。这个过程称作DNA转染,是研究基因或蛋白功能的常用方法。

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9.2-基因组编辑

CRISPR/Cas9系统在哺乳动物细胞中的应用,成为一种非常便利的在特定位置修改基因组的方式。在哺乳动物细胞中瞬转:(a)一或数个Cas9编码质粒、特定gRNA及要插入的目的序列,或者(b)一或两个质粒和RNA分子的组合(gRNA)。

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9.3-病毒生产

jetPRIME®对在常规培养基,如含血清DMEM中生产AAV和慢病毒的有很高的转染效率。

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9.4-绝佳的基因沉默

jetPRIME®非常适用于基因沉默研究,转染siRNA或miRNA。jetPRIME®在多种细胞系中可产生90%以上的内源基因敲除效率。在HeLa细胞中用jetPRIME®转染10 nM 靶向内源lamin A/C的双链siRNA,可将lamin A/C基因的表达显著降低到几乎无法检测的水平。(图A1)。

jetPRIME - siRNA
图A1:应用jetPRIME®进行的内源性核纤层蛋白A/C沉默。用10 nM 21-mer核纤层蛋白A/C siRNA对HeLa细胞进行转染。48小时后,用核纤层蛋白A/C的抗体通过免疫荧光显微镜检测核纤层蛋白A/C的沉默情况。

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9.5-几种核酸(多个DNA质粒、DNA和siRNA)的共转染

jetPRIME®非常适合进行DNA和siRNA/ miRNA或者几种DNA质粒的共转。我们用jetPRIME®进行DNA和siRNA转染,在多种细胞系中均可观察到很高的基因沉默和很低的细胞毒性。使用10 nM siRNA,可在贴壁细胞内实现90%以上的沉默(图A2)。

jetPRIME - cotransfection
图A2:jetPRIME®共转 DNA和siRNA,几个细胞系内的外源性荧光素酶沉默率。6孔板上,每孔转400 ng p4CMV-Luc和 10 nM的荧光素酶siRNA。

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10-品质

每批jetPRIME®试剂HeLa细胞DNA转染和GFP表达质粒检测,并且每瓶试剂都附带分析证书。