FectoPRO®

1-在悬浮CHO & HEK-293细胞中的获得超高蛋白质产量。

 

FectoPRO CH Arguments de vente vB

2-基本信息

 

FectoPRO CH Informations générales vB

3-可用参考

 

FectoPRO - Chinese references

经客户要求可提供大包装。如有需求,请联系我们。

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4-产品说明

首次通过瞬时转染基因表达获得卓越的蛋白质产量。FectoPRO®转染试剂盒用于增强悬浮CHO和HEK-293细胞在多种无血清培养基中进行低浓度的DNA(<1µg/ml==瞬转(TGE)。FectoPRO®转染易于从毫升级培养体扩大至数升,而保持原有的蛋白高表达。FectoPRO®转染产出高,DNA用量少,这是一种适合生物生产,成本低廉的解决方案。

5-惊人的蛋白质产量

FectoPRO®能够显著提升无血清培养基中悬浮CHO和HEK-293细胞的蛋白质及抗体产量(图1)。

FectoPRO - antibody yields CHO cells
图1. FectoPRO®在悬浮CHO细胞中表现出惊人的抗体产量。细胞以1 x 106 cells/ml接种在30ml FreeStyle™ CHO表达培养基中,分别按推荐方案进行转染, FectoPRO®(0.8µgDNA/ml)或FreeStyle™ MAX(1.25µgDNA/ml)。在转染1至6天后,用G蛋白生物传感器(fortéBIO® octet RED96系统)测量重组小鼠IgG的产量。数据由法国ProteoGenix SAS公司提供

FectoPRO®的转染效率大大超过生物生产过程中常用转染试剂,可以获得卓越的蛋白质产量(图3)。

FectoPRO - Microscopie
图2. FectoPRO®在悬浮CHO细胞中的高转染效率。在30ml FreeStyle™ CHO表达培养基中以1 x 106 cells /m接种FreeStyle™ CHO-S细胞,在FectoPRO®+FectoPRO® Booster或FreeStyle™ MAX(分别使用0.4µg/ml和1.25µg/ml的GFP表达质粒)进行转染。24小时后,荧光显微镜检测对GFP表达量。

FectoPRO - CHO cells

FectoPRO - HEK-293F cells
图3. FectoPRO®在悬浮CHO和HEK-293细胞中表现出卓越的蛋白质产量。 FreeStyle™ CHO-S和HEK-293F细胞在30ml FreeStyle™ CHO 或293 表达培养基中以1 x 106 cells/ml接种,使用FectoPRO®+FectoPRO® Booster(0.4µg DNA/ml)、FreeStyle™ MAX(1.25µg DNA/ml)或PEIpro®(1µg DNA/ml)进行转染。在转染72小时(CHO细胞)和120小时(HEK-293细胞)后,通过蛋白G亲和定量(HPLC)和 Western Blot测量IgG3-Fc(34 kDa)产量。FreeStyle™是Life Technologies™ Corporation(美国生命技术公司)的商标。

6-成本低:质粒DNA用量少

优质质粒DNA的制备成本非常高,尤其是在需要大量DNA及质粒来进行大规模蛋白质生产时。使用0.4~0.6µg DNA/106个细胞/ml,FectoPRO®可以节省40%~60%的DNA成本,从而使这种试剂盒成为生物生产过程中经济节约的高效解决方案。

FectoPRO - Table comparison competitor
表1 根据制造商的建议进行转染所需的DNA数量和试剂(FectoPRO®和同类产品)量。FreeStyle™是Life Technologies™ Corporation(美国生命技术公司)的商标。

7-持续的蛋白质生产

过去几年里,蛋白质生产过程的持续时间不断增加,多数蛋白质生产过程如今都能持续1至2周,以获得最优的蛋白质数量。我们开发FectoPRO®旨在确保蛋白质生产过程可以多持续几天,同时还能维持较高的细胞活性(图4)。

FectoPRO - Production + viability in HEK-293
图4. FectoPRO®在悬浮细胞中能进行持久的蛋白质生产。FreeStyle™ HEK-293F细胞在30ml FreeStyle™ 293 表达培养基中以1 x 106 cells/ml接种,使用FectoPRO®+FectoPRO® Booster(0.5µg DNA/ml)进行转染。使用蛋白G亲和定量(HPLC),在不同时间点检测IgG3-Fc产量。FreeStyle™ CHO-S也能得到类似的结果。FreeStyle™是Life Technologies™ Corporation(美国生命技术公司)的商标。

8-易于扩大

使用稳健且易于适应各种培养容器的方案来简化细胞生产过程。FectoPRO®转染无须调整方案就能线性地从30ml扩展至数升的细胞培养基。(图5)

FectoPRO - CHO viability

FectoPRO - CHO protein production

FectoPRO - Scalability
图5. FectoPRO®在CHO细胞中易于扩展和重复。FreeStyle™ CHO-S在30ml、100ml、300ml和1L FreeStyle™ CHO 表达培养基中以1 x 106 cells/ml接种,使用FectoPRO®+FectoPRO® Booster(0.5µg DNA/ml)进行转染。在培养的1-6天,使用胎盼蓝法检测细胞活性(A),使用蛋白G亲和定量法(HPLC)(B)和Western Blot(C)检测IgG3-Fc产量。C中“standard”为纯化后IgG3-Fc。FreeStyle™是Life Technologies™ Corporation(美国生命技术公司)的商标。

9-可重复的产量

采用严格受控的生产过程来制造和配制FectoPRO®。从而确保每次实验都能取得再现性极高的结果。此外,为了符合当前的监管准则,我们采用先进的质控体系来发布FectoPRO®,该体系包含一套可以确保不同批次都具有卓越稳定性的蛋白质生产规范(图6)。

FectoPRO - Reproductibility batch to batch
图6. 不同批次的FectoPRO®都表现出卓越的实验结果再现性。遵照标准方案使用3种不同批次的FectoPRO®(CCIII 078、CCIII 104或CCIII 106),悬浮CHO细胞在30mlCHO表达培养基中以1 x 106 /ml进行接种。在转染72小时后,通过蛋白G亲和定量检测IgG3-Fc产量。悬浮HEK-293细胞取得了类似的结果(数据未列出)。

10-兼容哺乳动物的表达体系

与其它商业试剂不同,FectoPRO®转染试剂适用于CHO和HEK-293细胞(图2和图3)。并且兼容各种配方培养基,因而操作非常方便和快捷(图7、表2和表3)。

FectoPRO - protein production
图7. FectoPRO®使各种培养基中生长的悬浮CHO细胞都能获得卓越的蛋白质产量。在30ml FreeStyle™ CHO、CD CHO 或 Pro-CHO™ 4表达培养基中,以1 x 106 cells/ml 接种CHO细胞,用FectoPRO® + FectoPRO®Booster 或 FreeStyle™ MAX进行转染。72h后使用蛋白G亲和定量法(HPLC)检测IgG3-Fc产量。
Table FectoPRO CHO
表2. 在不同的CHO细胞培养基中使用FectoPRO®获得的蛋白质产量
FectoPRO - Tableau HEK
表3. 在不同的HEK-293细胞培养基中使用FectoPRO®获得的蛋白质产量

FreeStyle、CD FortiCHO、CD OptiCHO、Expi293和CD293是Life Technologies™ Corporation(美国生命技术公司)的商标。
Pro-CHO、PowerCHO和Pro293是Lonza Group(瑞士龙沙集团)的商标。
HyClone、HyCell和TransFx是GE医疗集团(GE Healthcare)的商标。

HyClone、HyCell和TransFx是GE医疗集团(GE Healthcare)的商标。

FectoPRO还非常适合用于病毒生产。

11-应用

11.1 蛋白质生产

蛋白质生产是指小或中等规模至大规模细胞系内重组蛋白或多肽的过量表达。该过程产生的生物分子可以用于结构表征等研究目的,乃至治疗或医疗用途。

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12-品质

FectoPRO®符合生物制造准则。FectoPRO®切实保证不含动物源性成分,并限定化学成分,对每批生产都进行系统的批次管理和发布测试。此外,FectoPRO®转染试剂盒还经过先进的质量控制:蛋白质生产能力、细胞活性和完全无菌。此外,Polyplus-transfection®自2002年起通过ISO 9001质量管理体系认证,该认证等级向全球客户保证通过该等级认证的供应商能够提供可靠而有效的产品开发、制造、销售及客户支持。