FectoCHO™

1-提高在CHO细胞中瞬时表达蛋白质的产量

FectoCHO - Polyplus transfection

2-产品规格

FectoCHO - Polyplus transfection

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3-产品概述

生物制药市场对各种重组蛋白质和抗体在短期内生产的需求日益增长,从而迫切需要高效灵活的表达系统。瞬时基因表达就是满足这种需求的常用方法,但遗憾的是受到转染效率和固有产量的限制,尤其是采用 CHO 细胞。为了解决这个问题,我们开发了一种先进的瞬时表达系统,即 FectoCHO™ 表达系统,包含促进表达的新型化学限定的 CHO 培养基即 FectoCHO™ CD 表达培养基和性能强大的转染试剂 FectoPRO®

FectoCHO™ CD 表达培养基是专门针对各种 CHO 细胞如 CHO-K1、CHO-S 和 ExpiCHO™-S 进行优化从而使细胞的适应和培养变得极为简单:无需繁琐的适应和培养。此化学限定培养基配套FectoPRO®进行转染是最佳方案,使得采用瞬时基因表达得到最高的蛋白质和抗体产量:与竞争对手的系统相比,蛋白质产量提高了 4 倍。

4-订购信息

FectoCHO - Polyplus transfection

1 mL FectoPRO® 转染试剂可转染 800 mL 至 1 L FectoCHO™ CD 以上培养基。可按客户需求提供大包装。

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5-产品介绍

5.1-在悬浮 CHO 细胞中有着出众的蛋白质产量

专为瞬时转染和蛋白质表达优化的化学限定培养基-FectoCHO™ CD 表达培养基和高效的转染试剂-FectoPRO® 的组合,使得在各种 CHO 细胞例如 CHO-S 和 CHO-K1 均可得到更高的蛋白质产量。(图 1)Fig 1. FectoCHO Expression System - High protein yields - Polyplus-transfection

 

图 1: 与竞争对手的表达系统相比,FectoCHO™ 表达系统在 CHO-S 和 CHO-K1 细胞中得到更高的蛋白质产量。在FectoCHO™ CD 培养基或 FreeStyle™ CHO 培养基中培养CHO-S细胞,按照说明书推荐使用FectoPRO® 转染试剂 (0.5μg DNA/ mL) 或 FreeStyle™ MAX 转染试剂 (1.25μg DNA/mL) 进行转染。在 FectoCHO™ CD 表达培养基或 FreeStyle™ F17 中培养已悬浮适应的 CHO-K1 细胞,然后按照说明书推荐使用 FectoPRO® (0.8μg DNA/ mL) 或 FreeStyle™ MAX (1.25μgDNA/mL) 进行转染。转染7 天后,采用 protein G 生物传感器 (fortéBIO®BLItz) 检测 IgG3-Fc 的产量。

FectoCHO™ 表达培养基可在转染之前、期间和之后将细胞维持在理想的生理状态,与 FectoPRO® 的极高转染效率相结合,通过瞬时基因表达得到惊人的蛋白质和抗体产量。实际数据表明,与竞争对手的表达系统相比较,FectoCHO™ 表达系统可将蛋白质产量提高至4倍。(图 2)Fig 2. FectoCHO Expression System - CHO-K1 - Polyplus-transfection

Fig 2. FectoCHO Expression System - CHO-S - Polyplus-transfection

图 2: 配套组合的FectoPRO® 转染试剂和 FectoCHO™ CD 培养基在 CHO-K1 (A) 和 CHO-S (B) 细胞中的表现优于其主要竞争对手。A.在 FectoCHO™ CD 培养基或 FreeStyle™ F17 中培养已悬浮适应的 CHO-K1 细胞,然后按照说明书推荐使用 FectoPRO® (0.8μg DNA/mL) 或 FreeStyle™ MAX 试剂 (1.25μg DNA/mL) 进行转染。转染 7 天后,采用protein G 生物传感器 (fortéBIO®BLItz) 检测 IgG3-Fc 的产量。B.在 FectoCHO™ CD 培养基或 FreeStyle™ CHO 培养基中培养CHO-S 细胞,按照说明书推荐使用 FectoPRO® (0.5μg DNA/mL) 或 FreeStyle™ MAX 试剂 (1.25μg DNA/mL) 进行转染。转染 7 天后,采用protein G 生物传感器 (fortéBIO®BLItz) 检测 IgG3-Fc 的产量。

5.2-高密度细胞系统(如 ExpiCHO™-S 细胞)的理想选择

FectoCHO™ 表达系统尤其适用于高密度细胞,如 ExpiCHO™-S 细胞。FectoCHO™ CD 培养基能够在非常高的细胞密度下维持细胞的生长和活性长达10天,配合使用 FectoPRO® 可保证更高的转染效率,从而使在 ExpiCHO™-S 细胞中得到非常高的蛋白质产量。(图 3)Fig 3. FectoCHO Expression System vs ExpiCHO system - Polyplus-transfection

图 3: FectoCHO™ 表达系统在 ExpiCHO-S 细胞中的蛋白质生成动力学优于 ExpiCHO™ 表达系统。在 FectoCHO™ CD 表达培养基中培养ExpiCHO-S™ 细胞,按照说明书推荐使用 FectoPRO® 进行转染,或在 ExpiCHO™ 表达培养基中培养,并按照说明书推荐使用 ExpiFectamine™ CHO 转染试剂进行转染。
转染 10 天后,采用 protein G 生物传感器 (fortéBIO®BLItz) 检测 IgG3-Fc 的产量。

5.3-快速方便的 CHO 细胞适应

FectoCHO™ CD 表达培养基可在培养高密度CHO细胞的同时还能在倍增时间短的情况下保持出色的细胞活力。无论是何种 CHO 细胞,此专门研制的培养基都有着快速方便的细胞适应。(图 4)可在 FectoCHO™ CD 表达培养基中直接解冻细胞,再经过几次传代后即可进行转染,以达到最高的蛋白质产量。不需要连续适应培养,就可达到方便快速的细胞适应。

Fig 4. FectoCHO Expression system - ExpiCHO-S Adaptation - Polyplus-transfection

图 4:FectoCHO™ CD 培养基中方便快速的 ExpiCHO™-S 的适应。在 FectoCHO™ CD 表达培养基或 ExpiCHO™ 表达培养基中解冻并维持培养ExpiCHO-S™ 细胞。使用台盼蓝染色检测细胞的密度和活力。在 CHO-S 和 CHO-K1 细胞中也获得了类似的结果(数据未显示)。

悬浮的 CHO 细胞也可从其之前的培养基中直接转到 FectoCHO™ CD 培养基中而无需连续适应培养且不影响细胞的生长和活力。

5.4-化学限定组分的试剂盒

FectoCHO™ 表达系统包含3个完美搭配的组分:
• FectoCHO™ CD 表达培养基,优化用于瞬时基因表达的化学限定细胞培养基。
FectoPRO® 转染试剂,使用较低的 DNA 量即可得到惊人的蛋白质产量。
• FectoPRO® Booster 表达增强剂,通过增强基因表达来增加蛋白质的产量。

5.5-卓越的批间重复性

FectoCHO™ 表达系统的组分是采用严格控制的生产工艺进行生产和配制而成。从而保证了每次实验都能得到高度重复的结果,因此很容易得到重复的数据和相似的蛋白质产量。(图 5)Fig 5. FectoCHO Expression System - Reproducibility - Polyplus-transfection

图 5: FectoCHO™ 表达系统的批间重复性卓越。在不同批次的 FectoCHO™ CD 表达培养基中培养ExpiCHO™-S 细胞,并按照说明书推荐使用 FectoPRO® 试剂进行转染。转染 7 天后,使用台盼蓝染色检测细胞活力。采用protein G 生物传感器 (fortéBIO®BLItz) 检测 IgG3-Fc 的产量。

6-产品用途

FectoCHO™ 表达系统完美适用于在各种 CHO 细胞(例如 CHO-K1,CHO-S 和 ExpiCHO™-S 细胞)中采用瞬时基因表达方法来生产蛋白质和抗体。该化学限定成分的试剂盒是经过优化来发挥协同作用从而得到出众的蛋白和抗体的产量。

7-品质

FectoCHO™ 表达系统符合生物制造准则。FectoPRO®,FectoPRO® Booster和 FectoCHO™ CD 培养基保证不含任何动物源性成分,且限定化学成分。对生产的每批产品均进行系统的批次管理和放行检测。并且,FectoCHO® 表达系统的每个组分均采用先进的质量控制,如蛋白质生产能力、细胞活力和完全无菌等方面。
此外,Polyplus-transfection® 自 2002 年起就通过了 ISO 9001 质量管理体系认证;该级别的认证意味着向全球客户保证该供应商已经建立了可靠有效的产品开发、制造、销售和客户支持程序。